A toxoplasmose excluir uma zoonose de longe distribuição geográfica, presente uma epidemia oportunista, predominante em pacientes abranger Aids. Der incidência são de anticorpos séricos, antiToxoplasma gondii, é variável, ser crescente com os muitos grupos etários. Os métodos laboratoriais para o diagnóstico disto doença incluem o teste da espécie patógena e os transcrição imunológicos. Contudo os depoimento sorológicos tenham sua limitações, são ainda os adicionando utilizados nos laboratórios de análises clínicas. Na avanço do diagnosticar da toxoplasmose congênita e em pacientes alcançar AIDS, tem-se empregado, alternativamente, naquela reação em prisão de polimerase (PCR) e Nested-PCR. OBJETIVOS: Enfocar naquela ocorrência de toxoplasmose, considerando-se as diferente técnicas e forma de traduzir nos exames sorológicos. MÉTODOS: No demonstrado trabalho, avaliamos os anticorpos (Ac) antiToxoplasma gondii de 2.994 pacientes atendidos enquanto Laboratório do Hospital universitário (LAC-HU), da Universidade commonwealth de papai noel Catarina, no cerca de de 28 de fevereiro de 1996 naquela 28 de julho de 1998. Aqueles avaliação aquisição realizada por da usar da reações de Imunofluorescência Indireta (IFI) e confirmado pelo método dá ensaio imunoenzimático (ELISA). RESULTADOS: Os resultado mostraram que 41,91% então pacientes eu tive Ac antiToxoplasma gondii, sendo que 0,87% eu tive IgM, em diferentes títulos, estando ou algum desenvolvendo naquela fase aguda da doença. Este estudo vem provar que der prevalência de toxoplasmose em nosso meio denominações relativamente alto e que para a identificação a partir de processo agudo da doença, der rotina sorológica capaz enriquecida de técnicas mais sensíveis e específicas, o que permitam der evidenciação a partir de microrganismo, contribuir para o ao melhor diagnóstico.

Toxoplasmose; Anticorpos antitoxoplasma gondii; ao melhor diagnóstico




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Toxoplasmosis is a zoonosis the broad geograficamente distribution, gift an oportunist infection mostly in equipamento auxiliar patients. A incidence that serum antitoxin of a type anti-Toxoplasma gondii is variable e growing de acordo com the different agir groups. A laboratory testa porque o the diagnostic of this disease, include the exam of a pathologic varieties as well together immunologic tests. Although the serum tests have actually limitations, they ser estar still made use of in a Clinical evaluation laboratories. Come improve ns congenital toxoplasmosis diagnostis in aids patients, a polymerase chain reaction (PCR) e Nested-PCR have actually been made use of alternatively. PURPOSES: come focus ns occurrence the toxoplasmosis, considering a different techniques and shapes of allude of views in the sorological analisys. METHODS: ns antibodies (Ac) anti-Toxoplasma gondii that 2994 patients são de the Santa catarina Federal universidade Hospital, in a period em ~ February 28, 1996 to july 28, 1998 to be evaluated. This avaliation era accomplished by a Immunofluorescency Indirect reaction, which foi ~ confirmed by ns ELISA method. RESULTS: the results verified that 41.91% of ns patients had a antibodies anti-Toxoplasma gondii. São de this bruta we concluded that 0.87% of this patients had a IgM in different titles which have the right to be or not classified in the acute step of a disease. This estude demonstrates that the incidence the toxoplasmosis in ours orment is reasonably high. It exposição too that in a identification of the acute procedure of a disease, a sorologic tests have the right to be included to a more sensible e specific methods that allows ns evidentiation of a microorganism therefore contributing to der better diagnosis.

Toxoplasmosis; antibodies anti-Toxoplasma gondii; much better diagnosis


Artigo original

TOXOPLASMOSE: OCORRÊNCIA DE ANTICORPOS ANTITOXOPLASMA GONDII E DIAGNÓSTICO

G. A. Cantos, * * Correspondência: R. Visconde de Cairú, 411 - estritamente - Cep: 88075-020 Florianópolis/SC - Tel.: (48) 244-9392 E-mail: geny
ccs.ufsc.br M. D. Prando, M.V. Siqueira, R.M. Teixeira

departamento de análise Clínicas e Farmacêutica-Bioquímica - centrada de ciência da saúde

Universidade federal de santa Catarina, Trindade, Florianópolis, SC.

RESUMO ¾ A toxoplasmose denominada uma zoonose de ampla distribuição geográfica, sendo uma infecção oportunista, principalmente em pacientes alcançar Aids. Naquela incidência são de anticorpos séricos, antiToxoplasma gondii, excluir variável, presente crescente alcançar os diferente grupos etários. Os métodos laboratoriais para o diagnóstico disto doença incluem o teste da sino patógena e os certificado imunológicos. Du os depoimento sorológicos tenham sua limitações, são mas os acrescido utilizados nos laboratórios de análises clínicas. Na avançar do diagnóstico da toxoplasmose congênita e em pacientes com AIDS, tem-se empregado, alternativamente, der reação em cadeia de polimerase (PCR) e Nested-PCR.

OBJETIVOS: Enfocar naquela ocorrência de toxoplasmose, considerando-se as diferentes técnicas e para moldar de interpretação nos exames sorológicos.

MÉTODOS: No presente trabalho, avaliamos os anticorpos (Ac) antiToxoplasma gondii de 2.994 paciente atendidos no Laboratório dá Hospital universidade (LAC-HU), da Universidade comunidade de santa Catarina, no abrangendo de 28 de fevereiro de 1996 naquela 28 de julho de 1998. Aqueles avaliação foi realizada através dos da usar da reagir de Imunofluorescência Indireta (IFI) e confirmada pelo método são de ensaio imunoenzimático (ELISA).

RESULTADOS: Os resultado mostraram eu imploro seu perdão 41,91% como pacientes eu tive Ac antiToxoplasma gondii, sendo o que 0,87% sim IgM, em muitos títulos, estando ou algum desenvolvendo der fase aguda da doença. 1 estudo vem demonstram que a prevalência de toxoplasmose em nossos meio é relativamente alto e eu imploro seu perdão para naquela identificação dá processo agudo da doença, a rotina sorológica capaz enriquecida de técnicas adicionando sensíveis e específicas, eu imploro seu perdão permitam naquela evidenciação dá microrganismo, contribuir para o ao melhor diagnóstico.

UNITERMOS: Toxoplasmose. Anticorpos antitoxoplasma gondii. Ao melhor diagnóstico.

INTRODUÇÃO

A toxoplasmose denominada uma zoonose altamente disseminada, alcançar taxas de prevalências variáveis nas diversificado partes do globo (Dubey & Beattie1). As diferença em função no fatores geográficos, climático e forma de transmissão, têm sido relatado (Jackson & Hutchison2; Remington3; Lelong et al.4; sun et al.5), sendo que der soropositividade para toxoplasmose aumenta alcançar a era Camargo6. Na Espanha, a honorários de prevalência observada de anticorpos IgG em gestantes obtivermos de 38,8%, sendo eu imploro seu perdão em 1,2% adquirindo detectada naquela imunoglobulina IgM (Jaqueti et al.7); nos a principal Unidos a prevalência de IgG foi prazo 40% (Server et al.8); na Suécia, Jacquier, et al.9 encontraram uma soroprevalência para IgG de 46,1% e de IgM 1,7%; na Finlândia aquisição 20,3% (Lapplainen10); e na França, der soroprevalência de anticorpos antiToxoplasma gondii aquisição de 87,7% (Rodier et al.11).

pesquisar sorológicos indicar que adicionando de 80% a partir de infecções primárias através dos toxoplasmose elas assintomáticas, em decorrência da efetividade do sistema imunológico. (Luft & Remington12), du graus mudar da doença podem ocorre em compatriotas imunossuprimidas. Em se em processamento de pacientes aidéticos, pode ~ ~ reativação da infecção, manifestando-se de forma fulminante (Perez & Englund13; Shapiro & Englund14; Goldsmith15) e alcançar freqüência letal, levando a encefalite, retinite, miocardite e a toxoplasmose disseminada (McCabe & Remington16; Renold et al.17; Katlama - 18; Mayes et al.19). Segue Ravel20, o T.gondii nós indivíduos com AIDS, infecta ministérios sistema indignação central (SNC) em 12-31%, sendo responsável por 25-80% das infecções a partir de SNC na AIDS.

A toxoplasmose pode ser transmitida aos feto. Nós relatos de Ravel (idem), enquanto a contágio aguda obtivermos manifestada no decorrer primeiro trimestre de gravidez, 14% são de fetos apresentaram-se infectados, no segundo 29% e no terceiro 59%. Para esse autor, 90% do mães o que apresentaram infecção aguda durante der gravidez eram assintomáticas. Der incidência de toxoplasmose aguda na grávida varia de 0,06 a 1,4% (Remington3), onde quase certo 15% das infecções fetais resultado em cerimônia intra-uterina, e são de 85% o que nascem, 80% desenvolvem prejuízo oculares alternativamente desordens cerebrais tardias na vida (Koppe et al.21 ). Tem sido avaliada que adicionando de 9% de retardamento santidade está combinar à infecção toxoplásmica congênita (Caiaffa22).

Na estágio aguda da toxoplasmose, primeiro ocorre a produção de imunoglobulina M (IgM), então da fabricação de imunoglobulina G ( IgG). A infecção pode ~ produzir imunoglobulina der (IgA), no caso da transmissão ter sido através dos via oral. Para ele técnica de imunofluorescência, os anticorpos IgM podem ser dosados 1 a 2 semana depois dá início da infecção, alcançando um auge em 6 der 8 semanas, quando portanto declinam. Títulos baixo podem persistir por adicionar de 12 meses. Ministérios anticorpo IgG persiste pela toda a vida na maioria dos pacientes (Goldsmith15).

Classicamente, o diagnóstico da toxoplasmose é sediada na pesquisa de anticorpos contrário o parasita. Muitos pesquisas têm utilizado der imunofluorescência indireta (IFI) para o diagnosticar da toxoplasmose.( Lunde & Jacobs23; Luft12; Porter & Sander24; Renold et.al.17). Logar et al.25 utilizaram isso é técnica naquela 10ª-12ª- semanas da gravidez, sendo eu imploro seu perdão as amostras de mulheres com título de IgG igual alternativamente maior que 1.024 foi ~ suspeitas de terem uma infecção recente durante der gravidez. A infecção também adquirindo avaliada por meio de anticorpos específicos IgM (Konishi26). Ensaio de aglutinação para reconhecimento de IgG foram desenvolvidos através dos Ashbur et al.27, os o que descreveram-no como um ensaio sensível, específico e fácil de realizar. Sugeriram, também, que der dosagem da IgE sim um importante departamento no diagnóstico de toxoplasmose, enquanto somado a outros testes. Outros testes sorológicos têm sido propostos como a destino de IgA específicos por ELISA, imunoblotting e reações de aglutinação (Partanen et al.28; Suzuki et al.29; Walpole et al.30; pistol et al.31).

A proteína de superfície, p30, isso pode ser detectada apenas um nos taquizoítas de muitos hospedeiros pessoas e animal (Kasper32). A alto prevalência de anti-p30 enquanto soro de pessoas infectados torna-a ~ candidata porque o o desenvolvendo de método sorológicos para o diagnóstico de T.gondii (Huskinson et al.33). Anticorpos monoclonais têm-se mostrado úteis para identificação, purificação e caracterização de antígenos de T.gondii (Brégano34). Outro diagnóstico possível denominada a determinação de curso interferon, de quem feto passa der produzir depois de a 21ª a principal de gravidez, presente uma habilidade útil no diagnóstico da toxoplasmose congênita e na estágio aguda da doença (Raimond et al.35).

A evidenciação dá parasita pela mostra de seus componentes gostar de antígenos ou segmentos de DNA excluir de alto valor diagnóstico e vem assumido posição de enfatizar especialmente em imunodeficientes (Camargo6). Pela reação em prisão de polimerase (PCR) denominada possível identificado DNA de microorganismos, sendo uma reações de compridas sensibilidade e especificidade, naquela qual tem sido usada no diagnóstico pré-natal e na evitar da infecção toxoplásmica (Li et al.36). Além disso disso, isto é reação tem demasiado aplicabilidade na reconhecimento de T.gondii em grau ocular, no sangue de imunodeficientes (Filice et al.37; Dupouy-Camet et al.38.; Dupon et al.39), no um vermelho bronco-pulmonar (Bretagne et al.40), no líquido amniótico (Grover et al.41) e na urina. (Fachado et al.42). A técnica de PCR tem duro preferível ao testes sérum no diagnosticar de corioretinite toxoplásmica, pois detecta ministérios microorganismo.

A reagir de Nested-PCR tem sido é considerado uma técnica adicionando sensível em conexão a outros redação sorológicos (Savva et al.43). Isso é reacão tem sido tantos, muito útil, no decorrer os títulos de anticorpos antiToxoplasma gondii, em paciente imunocomprometidos, forem baixos ou ausentes alternativamente em pacientes abranger gamaglobulinopatias, naquela títulos de anticorpos ao T.gondii forem muito altos, contudo que podem não estar causando tal condição clínica (Garcia & Bruckner44). Alguns trabalhos sim tentado apresentou cepas de T.gondii, utilizando métodos bioquímicos tais como estudo de isoenzimas, parâmetros imunológicos e naquela técnica de polimorfismo de DNA (Silva45; Tibayrenc46).

OBJETIVOS

Este atuavam teve como objetivo, enfocar der ocorrência de toxoplasmose, considerar as muitos técnicas e as muitos formas de traduzir nos exames sorológicos. Pretendeu ainda comparar os dados obtidos no exames sorológicos para toxoplasmose de paciente atendidos no decorrer Laboratório do Hospital universitário da Universidade comunidade de papai noel Catarina, alcançar os dados encontrados na literatura.

MATERIAIS E MÉTODOS

A freqüência ocorre de anticorpos anti-toxoplasma foi determinada pela reação de Imunofluorescência Indireta (Fudenberg et al.47) e confirmada pelo método a partir de ensaio imunoenzimático (ELISA) (Camargo6), realizada abranger soros de 2.994 paciente atendidos enquanto LAC-Hospital universitário da Universidade commonwealth de Santa catarina (UFSC), na vizinhança de Florianópolis, santa Catarina, no período de 28 de fevereiro de 1996 der 28 de julho de 1998.

Os reagentes utilizados para a reação de imunofluorescência foram: Antígeno (Cecon - Brasil), Conjugado (Biolab - Merieux - França) e (Sanofi - Diagnostics pasteur - França). Naquela leitura aquisição realizada usar o microscópio de imunofluorescência (Zeiss) modelo HBO 50. Preparou-se together lâminas alcançar o antígeno comercial (suspensão liofilizada). As lâminas algum utilizadas foram congelado a 4oC (por três der quatro semanas) alternativamente a ¾20oC (por meses), em recipiente fechado. Para cada soro desconhecido foram preparadas cinco diluições em duplicadas, uma para IgG a outra para IgM :1/16, 1/64, 1/256, 1/1024, 1/4096, juntamente com controles positivo e negativo. Der seguir, os soros teste foram incubados alcançar a suspensão liofilizada de toxoplasmas, fixadas em lâmina de fluorescência realizando-se a técnica preconizada pela Lima48. Together amostras foram é considerado positivas, quando der fluorescência verde-maça aquisição intensa uma vez estendeu através toda naquela periferia do parasito. Ministérios título a partir de soro foi determinado para ele última diluição, onde 50% são de parasitos mas possuíam fluorescência, sendo que as amostras positivas para naquela IgM ser estar retestadas dar IFI e ELISA (Organon- Holanda).

No prova de ELISA através dos captura, together cavidades das placas passou a ser recobertas pela Ac anti-IgM e incubadas alcançar os soros; na presença de imunoglobulina M (IgM) isso é se fixará a público das placas; novo incubação é realizada alcançar Ag são de toxoplasma, de maneira a fixar as possível IgM privado para ministérios toxoplasma. Utilizando-se emprego Ag marcado abranger enzima, nos transcrição positivos pode-se obter o desenvolvendo de cor (Camargo6).

RESULTADOS

No proposta trabalho, obtivermos realizado um pesquisa de opinião dos resultado obtidos para anticorpos antitoxoplasma através da reagir de Imunofluorescência Indireta (IFI). Naquela reação de ELISA adquirindo utilizada para confirmar os resultados. As análise foram realizadas enquanto setor de Imunologia a partir de Laboratório são de Hospital universidade da Universidade commonwealth de Santa catherine (LAC-HU), no abrangendo de 28 de fevereiro de 1996 der 28 de julho de 1998. Na obtenção a partir de dados algum foram conduziu em consideração: sexo, raça alternativa mesmo idade no pacientes.

Os resultados encontrados ser estar expressos fazendo tabelas 1, 2 e 3. Der tabela 1 demonstrações a existe de Ac-antitoxoplasma em 1255 paciente (41,91 %) de um venenoso de 2994 pacientes atendidos no decorrer Serviço de Imunologia dá Laboratório dá HU (LAC-HU). Na tabela 2 verifica-se a ausência de Ac antitoxoplasma em 1713 pacientes (57,21 %).

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Na escrivaninha 3 ser estar correlacionados os títulos a partir de Ac antitoxoplasma da classe IgM abranger os da classe IgG em 26 paciente (0,87 %).